怎样检测生物组织中的糖类,脂肪和蛋白质
糖类中还原糖(例葡萄糖、果糖、麦芽糖等)可用斐林试剂检测。先准备组织样液,再准备0·1g/ml的氢氧化钠溶液、0.05g/ml硫酸铜溶液。方法步骤:1.(1)取2ml组织样液加入1支洁净的试管。
(2)再另取2支试管,分别加入2mlNaOH与硫酸铜溶液,再把硫酸铜溶液倒入氢氧化钠溶液的试管,振荡混合均匀,即为斐林试剂。
(3)把新配制的斐林试剂与组织样液,等体积混合,振荡摇匀,然后放入50~60度水浴中保温,观察颜色变化。如出现砖红色沉淀,即说明有还原糖。
非还原糖(淀粉用碘液检测即可)碘遇淀粉变蓝。
脂肪用苏丹三或苏丹四检测,材料可用浸泡过"的花生种子,先制成临时装片,再用显微镜观察。或者把试剂滴加到组织样液中,观察颜色变化。
临时装片制作:用刀片先在花子叶切开,然后做徒手切片,放在清水中,然后用毛笔蘸取很薄的一片放在载玻片中央,滴加苏丹三溶液染色3到5分钟,用吸水纸吸取多余染液,再用体积分数为50%酒精洗去浮色,盖上盖玻片。放在显微镜下观察。脂肪粒被苏丹三染成橘黄色、苏丹四染成红色。(上述徒手切片做不好,可在花生子叶上
刮取少量粉末,直接涂在载玻片上来替代。
蛋白质用双缩脲试剂来检测。双缩脲是由A液(0.1g/ml的氢氧化钠)、B液(O.01g/mL的硫酸铜溶液组成。)
使用时取组织样液(用蛋清稀释液或豆浆)一2mL加入洁净试管,然后先滴加1mLA液,振荡试管摇匀,再滴加3~4滴硫酸铜溶液,摇匀。蛋白质遇双缩脲生成紫色。
判断马铃薯中是否有糖类的实验要说出器材,方法和步
步骤如下:
1、工具:碘酒、小刀;
2、方法:用碘酒检测;
3、实验过程:切下一小片马铃薯,滴上几滴碘酒;
4、实验现象:马铃薯块变蓝;
5、实验结论:马铃薯含有糖类。
土豆富含碳水化合物、植物蛋白、维生素C、类胡萝卜素和膳食纤维,每100克土豆含钾502毫克,是少有的高钾食物,有助于降血压;类胡萝卜素是一种天然抗氧化剂,能保护心脏清除自由基。因此,心脏功能不好、高血压、高血脂等患者可适当多吃一些土豆,对心血管健康有好处。土豆很好蒸着吃,能很大限度地保留包括维生素C在内的营养素,而且淀粉颗粒充分糊化,更容易被消化分解,有助于减轻胃肠负担。不建议把土豆当菜吃,以免摄入过多的碳水化合物。
马铃薯的营养成分丰富而齐全,其丰富的维生素C(抗坏血酸)含量远远超过粮食作物;其较高的蛋白质、糖类含量又大大超过一般蔬菜。马铃薯营养齐全,结构合理,尤其是蛋白质分子结构与人体的基本一致,极易被人体吸收利用,其吸收利用率几乎高达100%。
蒽酮法测定植物干样中可溶性糖的详细步骤,有实践经验的更好,谢谢大家了
在作物的碳素营养中,作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉.它们在营养中的作用主要有:合成纤维素组成细胞壁;转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等;分解产物是其他许多有机物合成的原料,如糖在呼吸过程中形成的有机酸,可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸;糖类作为呼吸基质,为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量.由于碳水化合物具有这些重要的作用,所以是营养中很基本的物质,也是需要量很多的一类.
一、原理
糖在浓硫酸作用下,可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛,生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物,在一定范围内,颜色的深浅与糖的含量成正比,故可用于糖的定量测定.
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物,不但可以测定戊糖与己糖含量,而且可以测所有寡糖类和多糖类,其中包括淀粉、纤维素等(因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应),所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量,实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量.在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下,用蒽酮法可以一次测出总量,省去许多麻烦,因此,有特殊的应用价值.但在测定水溶性碳水化合物时,则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中,不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差.此外,不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同,果糖显色很深,葡萄糖次之,半乳糖、甘露糖较浅,五碳糖显色更浅,故测定糖的混合物时,常因不同糖类的比例不同造成误差,但测定单一糖类时,则可避免此种误差.
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为 620 nm ,故在此波长下进行比色.
二、实验材料、试剂与仪器设备
(一)实验材料:
任何植物鲜样或干样.
(二)试剂:
1、80 %乙醇.
2、葡萄糖标准溶液( 100 μg/mL ):准确称取 100 mg 分析纯无水葡萄糖,溶于蒸馏水并定容至 100 mL ,使用时再稀释 10 倍( 100 μg/mL ).
3、蒽酮试剂:称取 1.0 g 蒽酮,溶于 80% 浓硫酸(将 98% 浓硫酸稀释,把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中) 1000 mL 中,冷却至室温,贮于具塞棕色瓶内,冰箱保存,可使用 2 ~ 3 周.
(三) 仪器设备:
分光光度计,分析天平,离心管,离心机,恒温水浴,试管,三角瓶,移液管( 5 、 1 、 0.5 mL ),剪刀,瓷盘,玻棒,水浴锅,电炉,漏斗,滤纸.
三、实验步骤
1、 样品中可溶性糖的提取
称取剪碎混匀的新鲜样品0.5~1.0 g(或干样粉末5 ~100 mg ),放入大试管中,加入15 mL 蒸馏水,在沸水浴中煮沸 20 min ,取出冷却,过滤入100 mL容量瓶中,用蒸馏水冲洗残渣数次,定容至刻度.
2、标准曲线制作
取 6 支大试管,从 0 ~ 5 分别编号,按表 24-1 加入各试剂.
表 蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量
试 剂 管 号
0 1 2 3 4 5
100 μg/mL 葡萄糖溶液( mL ) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0
蒸馏水( mL ) 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0
蒽酮试剂( mL ) 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
葡萄糖量( μg ) 0 20 40 60 80 100
将各管快速摇动混匀后,在沸水浴中煮 10 min ,取出冷却,在 620 nm 波长下,用空白调零测定光密度,以光密度为纵坐标,含葡萄糖量( μg )为横坐标绘制标准曲线.
3、样品测定
取待测样品提取液 1.0 mL 加蒽酮试剂 5 mL ,同以上操作显色测定光密度.重复 3 次.
四、结果计算
式中: C ——从标准曲线查得葡萄糖量, μg .
V T ——样品提取液总体积 , mL .
V 1 ——显色时取样品液量, mL .
W ——样品重( g ).
注意 看原理哦 用蔗糖 葡萄糖都行哦
植物中还原糖的测定方法
总糖:
主要指具有还原性的葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖(水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解的淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。 还原糖:
在糖类中,分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都是还原糖。还原性糖包括所有单糖(除二羟丙酮)、乳糖、麦芽糖等。非还原性糖有蔗糖、淀粉、纤维素等,但它们都可以通过水解生成相应的还原性单糖。 分光光度计:
分光光度法则是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分

析。常用的波长范围为:(1)200,
400nm的紫外光区(2)400,760nm的
可见光区,(3)2.5,25μm(按波数计
为4000cm-1,400cm-1)的红
外光区。所用仪器为紫外分光光度
计、可见光分光光度计(或比色计)、
红外分光光度计或原子吸收分光光
度计。为保证测量的精密度和准确
度,所有仪器应按照*计量检定规
程或本附录规定,定期进行校正检
定。
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比。
糖含量的检测方法:
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